Как да рестартираме колона C18

Стъпка 1

Разкачете колоната C18 от потока на потока и сменете колоната в обратна посока. Раздвижването на разтворителя обратно през колоната в обратна посока ще разхлаби ефекта на опаковане, който се случва с течение на времето. Трябва да се внимава да не загубите голямо количество опаковъчен материал в края на колоната. Някои производители използват по-голяма мрежа в горния край на колоната, така че когато посоката на потока е обърната, по-голямата мрежа се намира в долната посока. Този метод на регенерация се нарича "backwashing". За да се предпази от опаковъчния материал, който протича в детектора на системата и вероятно причинява запушалка, той позволява системата да работи без свързания детектор и насочва изходящия поток на колоната към отпадъците.

Стъпка 2

Поставете входната тръба за разтворителя в серия от разтворители, за да елуирате съединенията, задържани с колоната в обратната посока. Използваните серии разтворители варират в техните хидрофилни характеристики. Чрез промяна на разтворителите ще елюирате съединения с еднакво разнообразна хидрофилна природа. Използвайте по 50 ml от всеки от следните разтворители: вода (ако използвате буфер в разтворителя), метанол, изопропанол, дихлорометан, хексан, дихлорометан и изопропанол.

Стъпка 3

Поставете отново колоната в правилната посока и използвайте разтворителя през системата. Използвайте най-малко 75 ml разтворител, за да измиете колоната, преди да продължите. Извършете инжектиране на стандарт, който сте изпълнили, когато колоната е нова и проверете резултатите. Обърнете специално внимание на часовете на максимално задържане, пиковите опашки и общото време за анализ. Степента, до която тези атрибути съвпадат с първоначалното изпълнение на колоната, когато е нова, ще покаже степента, до която колоната е била регенерирана. Ако резултатите не са задоволителни, сменете колоната с нова и изхвърлете старата колона в кошчето.